pc方法有哪些(pc方法的基本原理)

PCR常见的几种方法简介

PCR实验包括三大主要的热循环步骤 整个过程包括：变性、退火、延伸。在这个过程中需要多种必要的反应成分 ，通过对PCR的设置做相应的调整，便可以获得一些特殊的实验结果，如产率提高，特异性增强或反应时间缩短等

热启动PCR：常用于增强PCR扩增的特异性。通过借助一酶的修饰物来抑制某一种基本成分延迟DNA合成，直到PCR仪达到变性温度。这种修饰可避免产生非特异性扩增。由于DNA聚合酶在室温下的活性被抑制，热启动技术为在室温下配制多个PCR反应体系提供了极大的便利，且无需牺牲PCR反应的特异性。

降落PCR：另一种提升PCR反应特异性的方法是调整PCR循环的参数。在降落PCR中，前几个循环的退火温度设定为比引物的最高退火温度（Tm）再高几度，较高的温度有助于避免产生引物二聚体及非特异性引物-模板复合物的形成，因此可减少不希望出现的非目的扩增。在PCR起始阶段用较高的退火温度可减少非特异性PCR产物，促进特异性的扩增。

巢式PCR：巢式PCR是标准PCR的一种演变，其增强了反应特异性和目标扩增子的产量。在此方法中，需要设计两对PCR引物，一对外引物，一对巢式引物。需进行进行2轮PCR扩增，第一轮PCR的产物作为第二轮PCR的模板。

快速PCR：通过缩减PCR反应步骤所需的时间来完成更快的扩增，此条件特别适用于有高扩增能力的DNA聚合酶，这类聚合酶在每个结合中可引入更多的核苷酸。

Taq DNA聚合酶系列产品经过多步纯化精制而得。使用本产品扩增得到的PCR产物3′端带A碱基，可克隆至T载体。操作简单，扩增效果稳定，可实现1kb/30s延伸速度。

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